在纯化一种蛋白质并研究其性质的实验过程中，你遇到了一些问题，请利用你所掌握的知识解决这些问题：①实验开始

阶段，你已经获得大量可高效表达此蛋白质的细菌菌体，请写出两种破碎菌体的方法；②通过粗纯化，你得到100毫升样品，你计划用离子交换层析法纯化这些样品，已知该蛋白质的等电点为5.0，你所用的缓冲液的pH为7.5，为了使该蛋白质能与离子交换剂结合，你应使用阴离子交换剂还是阳离子交换剂？③得到纯化好的蛋白质样品后，你需要检验该样品的纯度并确定其分子量，简述如何进行实验；④接下来，你计划研究该蛋白质的变性与复性特性，你发现蛋白质样品浓度较低，不能满足实验要求，请写出两种可用于提高蛋白质浓度的方法；⑤在实验中，你发现只有在复性缓冲液中添加还原剂时，该蛋白质才能正常复性，恢复其天然构象与生物功能，请简要解释原因。