为提高重组转化效果，对同一种酶切后载体进行（）处理。

为提高重组转化效果，对同一种酶切后载体进行（)处理。

I和一个EcoRI酶切位点。P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。请根据上述信息分析回答下列问题。 （1）为了防止目的基因和质粒载体的酶切产物发生任意连接，酶切时应选用什么酶？ （2）酶切载体与目的基因连接后转化，此时涂平板应加什么抗生素？ （3）怎样筛选出含有插入片段的重组子？请设计一个简单方案。

某同学用5’-GCGTCTAGATCAGCACAATTACCTCCGTT-3’和GAAGGATCCTTAGTCCTGACCAAGATGGT作为引物，通过PCR获得了目的基因，进一步通过XbaⅠ和BamHⅠ双酶切、与质粒载体连接、转化大肠杆菌，获得阳性重组子（含目的基因与载体的重组DNA的大肠杆菌细胞）。但是，从阳性重组子中提取质粒-酶切-电泳的结果如图，注意，泳道1、2为参考标准；泳道3~6为预期的理论结果；泳道7~10为实际试验结果。请说明试验结果，并分析原因。（引物序列中，下划线标示限制酶识别位点，粗体部分为答题线索；大肠杆菌菌株DH5α含有dam甲基化酶，识别GATC并对第2位的A进行甲基化修饰；XbaⅠ的活性受识别位点出的甲基化影响，而BamHⅠ不受甲基化影响）

A.避免载体自身环化

B. 提高连接效率

C. 控制外源基因的插入方向

D. 便于转化后的筛选

E. 便于修改阅读框

A．将目的基因插入载体质粒的耐药基因

B．将亮氨酸自养型重组体转化亮氨酸异养型宿主

C．利用同位素标记目的基因作探针

D．提取重组体DNA限制性酶切后电泳

E．用目的基因编码蛋白的抗体

分子杂交手段筛选阳性重组体需要

A.便于修改阅读框

B.便于转化后的筛选

C.避免载体自身环化

D.提高连接效率

E.无法控制外源基因的插入方向

A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体

B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列

C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快

D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达

A、目的基因的获取

B、限制酶切割载体和目的基因

C、DNA重组体的转化

D、目的DNA与载体的连接

E、DNA重组体的筛选和鉴定

A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体

B.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快

C.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列

D.只要目的基因进入了受体细胞就能实现成功表达

构建载体时，使用双酶切相对于单酶切的优点在于（)

A.避免载体自身环化

B.提高连接效率

C.控制外源基因的插入方向

D.便于转化后的筛选

E.便于修改阅读框