下列方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达的是()
A.显微镜下直接观察受体细胞中是否含有目的基因
B.在含某种抗生素的培养基中培养导入了重组质粒的大肠杆菌
C.利用相应的DNA探针与受体细胞DNA分子进行杂交
D.提取受体细胞表达的蛋白质,利用抗原—抗体特异性反应进行检测
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A.显微镜下直接观察受体细胞中是否含有目的基因
B.在含某种抗生素的培养基中培养导入了重组质粒的大肠杆菌
C.利用相应的DNA探针与受体细胞DNA分子进行杂交
D.提取受体细胞表达的蛋白质,利用抗原—抗体特异性反应进行检测
A.经常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
A.经常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
长期以来,香蕉生产遭受病害的严重威胁,制约了其发展。目前,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示,质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:(1) 构建含抗病基因的表达载体 A 时,应选用限制酶(),对()进行切割。 (2) 培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体 A 中含有(),作为标记基因。 (3)能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是()和()。 (4)将目的基因导入植物细胞常用方法有多种,图中所示方法为()。(5)欲检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,可采用的技术是(),欲检测目的基因是否转录出了 mRNA ,可采用的技术是(),欲检测目的基因是否表达成功,可采用的技术() 。
A.对于转基因效率为100%的方法无需进行检测
B.用目标基因的一段序列作引物,以PCR法扩增目的基因进行电泳是为了检测外源基因是否转录
C.对外源基因的整合检测出现阳性后即可确定外源基因能在转基因动物中表达
D.导入外源DNA后都应进行外源基因的整合、转录及表达检测
A.苏云金杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达
B.抗虫基因导入棉花叶肉细胞后,可通过传粉、受精的方法,使抗虫性状遗传下去
C.标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因
D.种植转基因抗虫棉,棉铃虫不会产生抗性,这样可以有效消灭棉铃虫
B.将目标基因与基因载体相结合。为使目标基因能顺利进入受体细胞,并能够在受体细胞中复制和表达,必须将目标基因与一种特别的DN A分子基因载体重组
C.重组目标基因的导入。将外源重组目标基因转入到受体细胞中的过程,称为基因导入或基因转移。外源重组目标基因在受体细胞中要能够自主复制、转录、翻译,得以表达。由于受体生物特征的差异以及基因工程目的的不同,基因导入的方法也就不同。主要有转化、转染、电穿孔导入法、基因枪射人法、显微注射法、脂质体介导法等
D.转基因细胞或个体的鉴别与筛选。对被进行了基因转移处理的细胞或个体进行鉴别,以筛选出导入了外源目标基因的转基因细胞或个体
E.对筛选出的转基因细胞或个体进行大量培养,并检测导入的外源基因是否表达。如果以上工作都获得了成功,则基因技术工程就实现了
(1)进行转基因操作前,需用__________酶处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
(2分)
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自eDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间;若要检测干扰素基因在家蚕中是否表达,可分别采用__________、__________的方法逐步鉴定。(6分)
(3)通过PCR技术可大量获取目的基因,该PCR反应体系的主要成分包含:扩增缓冲液
(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、__________和__________。(4分)
(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以__________,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。(3分)
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