某研究机构利用一株重组大肠杆菌发酵产生以包含体形式存在的重组目标蛋白，请设计从全发酵液（含菌体）开始分离纯化该蛋白的技术路线，并说明每一步骤的作用，写出该路线中涉及的主要生物分离技术的原理及选择理由（选其中三种即可）。