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（请给出正确答案）
A.限制酶失活
B. 限制酶的星号活性
C. 有其他限制酶污染
D. 有抑制剂存在
E. 测试DNA中有其他DNA污染
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A.限制酶失活
B.限制酶的星号活性
C.有其他限制酶污染
D.有抑制剂存在
E.测试DNA中有其他DNA污染
下图一为含有目的基因的DNA（外源DNA），图二为某质粒，用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒，请根据上述信息分析回答下列问题。
（1）图中外源DNA和质粒分别有______和______个游离的磷酸基团。 （2）图中属于属于粘性末端切割的是 ______、______、______限制酶。 （3）如果用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒来重组质粒，其结果是___________________。 （4）如果使用EcoRⅠ酶切割外源DNA和质粒，将目的基因片段与切割后的质粒混合，加入DNA连接酶，获得的连接产物可能有哪几种情况？ （5）如果使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，比用EcoRⅠ酶切割的优点是__________________。 （6）将质粒和外源DNA连接后的产物转化大肠杆菌感受态后，如何鉴别和筛选含有重组质粒的细胞？
A.星号效应是在非最优条件下某些限制性内切酶对识别和切割序列的特异性上升的现象
B.连接酶连接限制性内切酶切割产生的粘性末端的连接效率比平末端高
C.在连接质粒和外源DNA的限制性内切酶酶切后的片段时，应该把此两种DNA按1:1的摩尔比混合进行连接反应。
D.已知某限制酶在一环状DNA上有3个识别位点，因此在该酶切割这一环状DNA时，可得到4个片段
A.即使只用一种限制酶，因为DNA是线性的，所以也可以迅速确定限制性片段序列
B. 内切核酸酶在等距离位点切割DNA，同时对于每个生物体的长度是特异的
C. DNA的线性意味着单限制酶切片段的长度之和等于DNA的总长，而双酶切产生的重叠片段则产生模糊的图谱
D. 这些内切核酸酶的消化活性是物种特异的
E. 这一技术同时为核苷酸序列提供了广泛信息
A、以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的
B、若要把相应片段连接起来,应选用DNA聚合酶
C、上述能进行连接的两个片段,其连接后形成的DNA分子是
D、限制酶和DNA连接酶作用的部位都是磷酸二酯键
A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端
B.用两种限制酶切割目的基因露出黏性末端
C.将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处
D.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增
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