将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为()
A.亲和沉淀
B.聚合物沉淀
C.金属离子沉淀
D.盐析沉淀
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A.亲和沉淀
B.聚合物沉淀
C.金属离子沉淀
D.盐析沉淀
A.亲和色谱是利用固定相配基与生物大分子之间的特殊生物亲和力的不同实现分离的。
B.亲和色谱是应用生物高分子物质能与相应专一配基分子可逆结合的原理,将配基通过共价键牢固地结合于固相载体上制得亲和吸附系统。
C.常用的亲和色谱载体主要有多孔玻璃载体、聚丙稀酰胺载体、纤维素载体、葡聚糖凝胶载体、琼脂糖凝胶和交联琼脂糖凝胶载体等。
D.亲和层析中常用的特殊配基有某一抗原的抗体、某一酶的专用抑制剂、某一激素的受体等。
A.寻找可与底物 (S) 专一可逆结合的配基
B.将配基 (L) 通过共价键偶联到基质, 并要求偶联后配基L与底物S的亲和力不变
C.配基L与底物S吸附并与杂质分离, 将杂质洗出
D.洗脱目标物, 即分离纯化
A.亲和层析载体如琼脂糖、 葡聚糖等, 在碱性条件下用溴化氰处理, 可引入活泼的 “亚氨基碳酸盐”中间体;再在弱碱的条件下直接可与含有游离脂肪氨基或芳香族氨基的配基偶联
B.多糖与 0.1mol / L 的高碘酸钠氧化反应 24h 会产生醛, 在温和条件下, 醛与赖氨酸上的ε-NH2进行亲核攻击, 生成席夫碱, 接着用硼氢化钠还原, 生成稳定的烷基胺
C.在热的浓碱溶液中, 多糖类化合物与环氧氯丙烷作用生成环氧化合物;在碱性条件下, 其环氧化合物又能与氨基酸或蛋白质上氨基偶联
D.二乙烯砜等双功能试剂, 对琼脂糖类多糖的活化有许多优点: 反应速度快, 条件温和, 能与氨基、 糖类、 酚、 醇类等偶联
A.二硫键用二硫苏糖醇和二硫赤藓糖醇等处理
B.二硫键用巯基乙醇、半胱氨酸等处理
C.偶氮键用含有 0.1mol / L 连二亚硫酸钠的 0. 2mol / L 硼酸缓冲液处理
D.硫酯键用 pH 11.5(或 1mol / L)羟胺处理 30min
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