题目内容
（请给出正确答案）
A.第一轮PCR扩增的是同一条DNA模版链
B. 第二轮PCR扩增的不是同一条DNA模板链
C. 需要RNA作为引物
D. 一定要使用TaqDNA高保真酶进行扩增
E. 最后一轮PCR不需引物即可进行扩增
参考答案
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A.只能在DNA片段的特定部位产生突变
B. 不需要测序确定突变结果
C. 重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应
D. 大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应
E. 重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
A.增加镁离子浓度容易产生正向突变
B. 第一轮PCR扩增的是不同DNA模版链
C. 第二轮PCR扩增的是同一DNA模板链
D. 第三轮PCR需要两种外侧寡核苷酸引物进行扩增
E. 该方法产生的DNA片段需要经过测序来验证是否发生其他突变
A.首先要将突变基因克隆到突变载体
B. 需要使用连接酶封闭缺口
C. 突变位点位于载体上
D. 保真度比重组PCR定点突变要高
E. 含有突变位点的重组载体可转化大肠杆菌体内进行扩增
A.随机引物体外重组法需用DNA酶消化模板链产生随机大小片段
B. DNA重组技术可用超声波切割产生不同的DNA小片段
C. 连续易错PCR方法中调整4种dNTP的浓度可提高突变率
D. 相对于定点突变，筛选正向突变难度加大E交错延伸PCR主要特点是将PCR中的退火和延伸合二为一
A.定向进化的突变是随机的，不确定的
B. 定向进化的突变位点的数目是不确定的，但突变的个数可预知
C. 定向进化的效应是可预知的
D. 定点突变的突变位点是不确定的
E. 定点进化的突变效应一定是已知的
A.催化一条双链DNA3′端羟基与另一条双链DNA5′端磷酸根形成3′，5′磷酸二酯键
B. TaqDNA聚合酶具有3′→5′外切酶活性，PCR扩增过程中有校正功能
C. 增加酶量可以提高反应速度，减少碱基错配
D. 扩增的DNA片段越长，错配概率越大，每次循环移码突变率为1/8000左右
E. 在引物的3′-OH末端加入脱氧单核苷酸，形成3′，5′磷酸二酯键
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