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提问人：网友liangexiang
发布时间：2022-01-07
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如何将一平末端的DNA片段与BamHI形成的粘末端连接？
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第2题
根据此酶切结果推测该DNA片段上酶切位点的分布，选择正确的描述。
A.有两个HindIII切点
B.HindIII切点与一个BamHI切点之间的距离为0.3Kb
C.一个BamHI切点距离DNA末端距离为1.2Kb
D.两个BamHI切点之间相距1.6Kb
第3题
【单选题】限制性内切酶是一类核酸切割酶,可辨识切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制性内切酶BamHI、EcoRI、HindlII以及BglII的辨识序列。箭头表示每一种限制性内切酶的特定切割部位,其中哪两种酶所切割出来的DNA片断末端可以互补连合？其正确的末端互补序列为()。
A.BamHl和EcoRl;末端互补序列—TTAA
B.BamHI和HindIII;末端互补序列一TCGA
C.BamHI和BgIII;末端互补序列一CTAG
D.EcoRI和HindlII;末端互补序列—TTAA
第5题
某一重组DNA的载体部分有两个BamHI酶切位点。用BamHI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的BamHI酶切位点共有()。
某一重组DNA的载体部分有两个BamHI酶切位点。用BamHI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的BamHI酶切位点共有（)。
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A.4个
B.3个
C.1个
D.2个
第6题
下列关于限制性内切酶的叙述正确的是（）。
A.星号效应是在非最优条件下某些限制性内切酶对识别和切割序列的特异性上升的现象
B.连接酶连接限制性内切酶切割产生的粘性末端的连接效率比平末端高
C.在连接质粒和外源DNA的限制性内切酶酶切后的片段时，应该把此两种DNA按1:1的摩尔比混合进行连接反应。
D.已知某限制酶在一环状DNA上有3个识别位点，因此在该酶切割这一环状DNA时，可得到4个片段
第7题
在基因克隆中，所得目的基因片段只有平齐末端，将其与载体连接的较为高效的方法有（多选）
A.直接使用DNA连接酶连接
B.利用Linker或Adaptor连接
C.末端加尾法连接
D.T-A克隆方法连接
第8题
你想把一段cDNA克隆到一表达载体上，这样便能在E.coli中大量生产该蛋白。cDNA是BamHI切下的片段，准备将其插入
到载体的BamHI位点上，这次是你首次做克隆，因而严格遵照指南上的步骤。
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首先你得切载体DNA，且用碱性磷酸酶去除5'-磷。第二步，把处理过的载体与BamHI切出的cDNA片段混合加入连接酶后温育，连接后将它与感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在含抗生素的固体培养基上，杀死所有未转入载体的细胞，而转入了载体的细胞由于其抗生素抗性而存活下来。
克隆手册上提到了四种对照：①未和连接混合物混合的细菌涂平板；②转入未切过的载体的细胞涂平板；③酶切过但未用碱性磷酸酶去除5'-磷的载体，未加外源cDNA片段但加连接酶温育的混合物与感受态细胞混合涂平板；④载体酶切过，碱性磷酸酶处理过，无cDNA片段加连接酶温育后和感受态细胞混合涂平板。
第一次做该实验的实验组和四个对照组借用同宗的感受态细胞，但所有平板上菌落太多而无法数清(见表16-3-40)。第二次做时，采用自己准备的细胞，但没有一个平板上有菌落长出。你又做了一次，这次的结果见表16-3-40。你从样品中挑了几个菌落，提取质粒DNA后用BamHI处理，有九个菌落生成和线状载体相同大小的一条带，但另三个菌落含有你需要克隆的cDNA片段。
| 表16-3-40 Results of Your cDNA Cloning Endeavor | ||||
| 样品制备 | 实验结果 | |||
| 1 | 2 | 3 | ||
| 对照1 对照2 对照3 对照4 实验样品 | 只有细胞 未切的载体 无磷酸化酶、无cDNA 无cDNA | TMTC TMTC TMTC TMTC TMTC | 0 0 0 0 0 | 0 ＞1000 435 25 34 |
| TMTC=too many to count |
第9题
以下不属于目的基因与载体重组的连接方法是（)。
A.同种限制性核酸内切酶产物之间的连接(黏性末端连接法)
B.产生相同末端结构的不同限制性酶切产物之间的连接
C.不同末端结构的片段之间的连接
D.平末端的DNA连接
E.随意连接
